非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查怎么做,微生物限度儀廠家告訴您,下面小編就來詳細介紹一下。
非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查的步驟如下:
1. 準備所需工具和培養(yǎng)基,如平皿、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等。
2. 選擇適當?shù)姆椒ㄖ苽涔┰囈海鐑A注法或涂布法。傾注法是將供試液1ml置直徑90mm的無菌平皿中,注入15~20ml溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,混勻,凝固,倒置培養(yǎng)。涂布法則取適量溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,注入直徑90mm的無菌平皿,凝固,制成平板,然后每平板表面接種供試液不少于0.1ml。
3. 在每個平皿中制備兩個平皿,以算術(shù)平均值作為計數(shù)結(jié)果。
4. 根據(jù)表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計數(shù),并測定供試品對照組及菌液對照組菌數(shù)。
5. 計算各試驗組的平均菌落數(shù)。
6. 按照每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備一個平皿的要求進行試驗,計數(shù)后與標準對比以確定結(jié)果是否符合要求。
若要使用薄膜過濾法進行檢查,應(yīng)按以下步驟操作:
1. 選用孔徑不大于0.45μm的濾膜,直徑一般為50mm。
2. 供試品及其溶劑應(yīng)不影響濾膜材質(zhì)對微生物的截留。
3. 水溶性供試液過濾前先將少量的沖洗液過濾以潤濕濾膜。油類供試品則應(yīng)在使用前充分干燥。
4. 供試液經(jīng)薄膜過濾后,若需要用沖洗液沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml??倹_洗量一般不超過500ml,最多不得超過1000ml。
5. 取適量供試液(一般取相當于1g、1ml或10cm2的供試品),加至適量的稀釋液中,混勻,過濾。用適量的沖洗液沖洗濾膜。
6. 若測定需氧菌總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板上;若測定霉菌和酵母總數(shù),轉(zhuǎn)移濾膜菌面朝上貼于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。按表1規(guī)定條件培養(yǎng)、計數(shù)。
7. 每株試驗菌每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。同法測定供試品對照組及菌液對照組菌數(shù)。
如果需要使用MPN法,應(yīng)按以下步驟進行:
1. 取至少3個連續(xù)稀釋級的供試液,每一稀釋級取3份1ml分別接種至3管裝有9~10ml胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中,同法測定菌液對照組菌數(shù)。
2. 必要時可在培養(yǎng)基中加入表面活性劑、中和劑或滅活劑。
3. 接種管置30~35℃培養(yǎng)不超過3天,逐日觀察各管微生物生長情況。
4. 如果由于供試品的原因使得結(jié)果難以判斷,可將該管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,在相同條件下培養(yǎng)1~2天,觀察是否有微生物生長。
5. 根據(jù)微生物生長的管數(shù)查被測供試品1g、1ml或10cm2中需氧菌總數(shù)的最可能數(shù)。
在完成上述步驟后,根據(jù)結(jié)果判斷是否符合要求。如果計數(shù)方法適用性試驗中試驗組菌落數(shù)減去供試品對照組菌落數(shù)的值與菌液對照組菌落數(shù)的比值在0.5~2范圍內(nèi)或試驗組菌數(shù)在菌液對照組菌數(shù)的95%置信限內(nèi),則可認為檢查結(jié)果符合要求。如果各試驗菌的回收試驗均符合要求,則可按照所用的供試液制備方法及計數(shù)方法進行該供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)計數(shù)。如果方法適用性確認時還存在一株或多株試驗菌的回收達不到要求,則應(yīng)選擇回收最接近要求的方法和試驗條件進行供試品的檢查。